Vairākas joslas pcr

Viens no iespējamiem vairāku joslu cēloņiem PCR ir nespecifiska grunts atlaidināšana. ... Pārāk daudz PCR ciklu (vairāk nekā 30) arī var izraisīt vairākas joslas, jo ar katru ciklu palielinās kļūdu iespējamība. DNS piesārņojums ir vēl viens iespējamais faktors.

1. Kāpēc gēla elektroforēzē ir vairākas joslas??
2. Kā novērst vairāku joslu traucējumus PCR?
3. Kas ir PCR joslas??
4. Kāpēc RAPD ir vairākas joslas??

Kāpēc gēla elektroforēzē ir vairākas joslas??

Gēla matrica darbojas kā siets: mazākas DNS molekulas migrē ātrāk nekā lielākas, tāpēc dažāda lieluma DNS molekulas elektroforēzes laikā sadalās atšķirīgās joslās.

Kā novērst vairāku joslu traucējumus PCR?

Populāras atbildes (1)

1. veiciet reakciju ar negatīvu kontroli (bez veidnes). ...
2. Palieliniet atkausēšanas temperatūru. ...
3. Pārveidojiet gruntējumu un padariet 3 ′ garāku. ...
4. Palieliniet atlaidināšanas laiku, ja nespecifiskie produkti ir īsāki par jūsu mērķi. ...
5. Izmantojiet mazāk DNS veidnes.
6. Mēģiniet pieskarties PCR.

Kas ir PCR joslas??

Vāja augšējā josla (298 bp) identificē PCR produktu, kas pastiprināts no viena mērķa genomā. Spilgtākā apakšējā josla (238 bp) identificē vairāku mērķu PCR produktu ar 10 atkārtojumu kopijām vienā genomā. Abos šajos mērķa reģionos ir 100% identiskas primeru saistīšanās vietas.

Kāpēc RAPD ir vairākas joslas??

Tā kā RAPD tiek ģenerēti nejauši atkvēlinot, izmantojot 10 nukleotīdu grunti, varētu sagaidīt, ka pēc katra izmantotā praimera būs vairāki fragmenti. ... Atkarībā no salīdzināmā (vairāk vai mazāk ģenētiski saistīts) polimorfo joslu skaits mainīsies.